Определение ретинола пальмитата и токоферола ацетата в липидных микрокапсулах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием

Представлена методика пробоподготовки для определения токоферола ацетата (ТА) и ретинола пальмитата (РП) в липидных микрокапсулах методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием (ВЭЖХ-УФ) в изократическом режиме элюирования. Методика включает растворение микрокапсул при нагревании, охлаждение раствора, центрифугирование, фильтрацию и хроматографирование в выбранных условиях. На основании спектрофотометрических измерений определена оптимальная длина волны детектирования 288 ± 2 нм, позволяющая осуществлять совместное определение РП и ТА. Рассмотрено влияние состава подвижной фазы (ПФ) на хроматографические параметры (время удерживания, площадь пика, разрешение, ширина пика, коэффициент асимметрии пика) для стандартных образцов ТА и РП: наилучшие значения указанных параметров обеспечивает использование подвижной фазы ацетонитрил-изопропиловый спирт-1,2-дихлорэтан в объемном отношении 55:40:5. Предложенная методика позволяет определять ТА в диапазоне содержаний от 0 до 5 % и РП — от 0 до 10 %. Правильность результатов определения жирорастворимых витаминов (ТА и РП) в липидных микрокапсулах подтверждена методом «введено – найдено». Степень извлечения компонентов при использовании предложенной пробоподготовки составила не менее 98,5 % для ТА и не менее 99,6 % для РП. Методика может быть рекомендована для определения жирорастворимых витаминов в лабораториях контроля качества фармацевтических, косметических и пищевых производств.

1. Figueiredo J. A., Silva C. R. P., Souza Oliveira M. F., et al. Microencapsulation by spray chilling in the food industry: Opportunities, challenges, and innovations / Trends Food Sci. Technol. 2022. Vol. 120. P. 274 – 287. DOI: 10.1016/j.tifs.2021.12.026

2. Dhakal S. P., He J. Microencapsulation of vitamins in food applications to prevent losses in processing and storage: A review / Food Res. Int. 2020. Vol. 16. P. 137 – 180. DOI: 10.1016/j.foodres.2020.109326

3. Jadoon S., Waseem A., Yaqoob M., Nabi A. Flow injection spectrophotometric determination of vitamin E in pharmaceuticals, milk powder and blood serum using potassium ferricyanide — Fe (III) detection system / Chinese Chem. Lett. 2010. Vol. 21. N 6. P. 712 – 715. DOI: 10.1016/j.cclet.2009.11.013

4. Qi F. F., Tao L. M., Dai Y. M., el al. Optimization and application of high-throughput supported liquid extraction for simultaneous determination of carotenoids and fat-soluble vitamins in serum / J. Chromatogr. B: Anal. Technol. Biomed. Life Sci. 2021. Vol. 1173. 122672. DOI: 10.1016/j.jchromb.2021.122672

5. Khan A., Khan M. I., Iqbal Z., et al. An optimized and validated RP-HPLC/UV detection method for simultaneous determination of all-trans-Retinol (Vitamin A) and α-Tocopherol (Vitamin E) in human serum: Comparison of different particulate reversed-phase HPLC columns / J. Chromatogr. B: Anal. Technol. Biomed. Life Sci. 2010. Vol. 878. N 25. P. 2339 – 2347. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.07.009

6. Craft N. E., Furr H. C. Chapter 2 — Methods for assessment of Vitamin A (Retinoids) and carotenoids / Laboratory Assessment of Vitamin Status / D. Harrington, Ed. — Elsevier Inc., 2019. P. 21 – 47. DOI: 10.1016/B978-0-12-813050-6.00002-4

7. de la Cruz Quiroz R., Chotyakul N., Saraiva J. A., et al. Retention of Ascorbic Acid, Retinol, β-Carotene, and α-Tocopherol in Milk Subjected to Pressure-Assisted Thermal Processing (PATP) / Food Eng. Rev. 2020. Vol. 13. P. 634 – 641. DOI: 10.1007/s12393-020-09242-z

8. ГОСТ Р 54635–2011. Продукты пищевые функциональные. Метод определения витамина A. — М.: Стандартинформ, 2013. — 15 с.

9. ОФС.1.2.3.0017.15. Методы количественного определения витаминов / Государственная фармакопея РФ XIV издания.

10. Temova Rakusa Z., Srecnik E., Roskar R. Novel HPLC-UV method for simultaneous determination of fat-soluble vitamins and coenzyme Q10 in medicines and supplements / Acta Chim. Slov. 2017. Vol. 64. P. 523 – 529. DOI: 10.17344/acsi.2016.2856

11. ГОСТ 32043–2012. Премиксы. Методы определения витаминов A, D, E. — М.: Стандартинформ, 2012. — 16 с.

12. ГОСТ Р 54950–2012 (ИСО 14565:2000). Корма для животных. Определение содержания витамина А методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. — М.: Стандартинформ, 2012. — 15 с.

13. ГОСТ EN 12822–2014. Продукты пищевые. Определение содержания витамина Е (альфа-, бета-, гамма- и дельта-токоферолов) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. — М.: Стандартинформ, 2014. — 25 с.

14. ГОСТ Р 54949–2012 (ИСО 6867:2000). Корма для животных. Определение содержания витамина Е методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. — М.: Стандартинформ, 2012. — 11 с.

15. Тимофеев Н. П. Содержание витаминов в листьях левзеи сафлоровидной (на фоне экдистероидов) / Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования. Т. 3. — М.: ВНИИССОК, 2017. С. 72 – 74.

16. Востоков В. М., Карташев В. Р. Хроматографический контроль биохимической активности жирорастворимых витаминов (A, D, E) в пищевой и кормовой продукции / Изв. вузов. Серия: Химия и химическая технология. 2006. Т. 49. № 4. С. 115 – 118.

17. Белозерцева Е. А., Финкельштейн Е. И., Еремин С. В., Швец В. И. Новый подход к ВЭЖХ-анализу жидких витаминсодержащих лекарственных форм / Вестн. МИТХТ им. М. В. Ломоносова. 2012. Т. 7. № 2. С. 58 – 64.

18. Самусева К. Р. Контроль содержания жирорастворимых витаминов в косметических кремах / Тезисы докладов VIII Международной научно-практической конференции студентов и магистрантов «Молодость. Интеллект. Инициатива». Витебск, 2020. С. 97 – 98.

19. Тринеева О. В., Сафонова Е. Ф., Сливкин А. И. Определение витаминов А и Е в тонком слое при совместном присутствии / Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2015. Т. 3. С. 129 – 134.

20. Романов О. Е., Будинов С. В., Штыков С. Н. Тонкослойная хроматография витаминов А и Е на силикагеле / Сорбционные и хроматографические процессы. 2014. Т. 14. № 4. С. 563 – 571.

21. Государственная фармакопея СССР. XI издание. — М.: Медицина, 1987. — 324 с.

22. Фадейкина И. Н., Пеункова Е. С., Зуев Б. К. Определение витамина Е (ацетата α-токоферола) на поверхности кожи человека методом ИК-Фурье спектрометрии и изучение некоторых аспектов его трансдермального переноса / Журн. аналит. химии. 2021. Т. 76. № 2. С. 130 – 134. DOI: 10.31857/S0044450221020080

23. Финкельштейн Е. И., Рудакова И. П., Самылина И. А. Методы количественного определения витаминов в лекарственных формах / Фармация. 2007. Т. 4. С. 45 – 48.

24. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издания. — М.: Институт фармакопеи и стандартизации в сфере обращения лекарственных средств, 2018. — 704 с.

25. Михеева Е. В., Анисимова Л. С. Физико-химические методы определения витамина Е в различных объектах (обзор) / Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 2005. Т. 71. № 2. С. 3 – 9.

26. Кульнева Ю. Ю. Оптимизация определения жирорастворимых витаминов / Материалы VI (63-й) ежегодной научно-практической конференции «Университетская наука — региону» Северо-Кавказского федерального университета. — Ставрополь, 2018. С. 383 – 387.

27. Kazakevich Y. V., LoBrutto R., Eds. HPLC for Pharmaceutical Scientists. — John Wiley & Sons Inc., 2007. — 1104 p. DOI: 10.1002/0470087951

28. Gogal’ová Z., Kahle V., Šesták J. An improved design of the fused silica capillary flow cell for absorbance detection in microcolumn liquid chromatography / Anal. Chim. Acta. 2023. Vol. 1238. 340637. DOI: 10.1016/j.aca.2022.340637

29. Алексеева А. С., Шемерянкина Т. Б., Лякина М. Н. и др. Анализ витамина А в поливитаминных препаратах / Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2021. Т. 11. № 3. С. 174 – 184. DOI: 10.30895/1991-2919-2021-11-174-184

30. Костарной А. В., Голубицкий Г. Б., Басова Е. М. и др. Использование высокоэффективной жидкостной хроматографии для анализа многокомпонентных лекарственных препаратов / Журн. аналит. химии. 2008. Т. 63. № 6. С. 566 – 580.

31. ГОСТ Р 54634–2011. Продукты пищевые функциональные. Метод определения витамина E. — М.: Стандартинформ, 2013. — 15 с.

32. Rimkus G. G., Schubert M., Morgan D., Jungjohann S. Rapid direct analysis of retinyl palmitate (vitamin A) in fortified vegetable oils by HPLC-FLD / Food Addit. Contam.: Part A. 2022. Vol. 39. N 1. P. 24 – 34. DOI: 10.1080/19440049.2021.1977854

33. Воронцова О. С., Маркова К. В. Способ определения витамина A (ретинола) в пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии / Сб. науч. трудов Международной научно-практической конференции «Здоровье и окружающая среда». — Минск, 2016. С. 227 – 229.

34. Воробьева О. А. Особенности пробоподготовки при проведении ОФ-ВЭЖХ анализа токолов в масле семян тыквы / Фундаментальные и прикладные исследования: проблемы и результаты. 2016. Т. 24. С. 147 – 151.

35. Рудаков О. Б., Хорохордина Е. А., Рудакова Л. В., Грошев Е. Н. Ацетонитрил-уникальный растворитель для жидкостной хроматографии и экстракции / Вестник Воронежского гос. ун-та. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2015. Т. 3. С. 41 – 46.

36. Садек П. Растворители для ВЭЖХ. — М.: Бином. Лаборатория знаний, 2006. — 704 с.

37. Филимонов В. Н., Замуруев О. В. Многопараметрическая оптимизация состава трехкомпонентной подвижной фазы для хроматографического разделения смеси жирорастворимых витаминов методом нормально-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии / Журн. физ. химии. 2001. Т. 75. ¹ 12. С. 2226 – 2232.